|
| |
| 技术交流 |
| RNasin核酸酶抑制剂 |
| 2006-04-24 12:51:32 |
|
(已经被浏览776次)
|
1. RNasin核酸酶抑制剂是什么？有什么用？
RNasin核酸酶抑制剂是由Promega研究和开发的，具有广谱的RNA酶抑制活力，用于清除RNA酶污染。
2. RNasin核酸酶抑制剂和重组的RNasin核酸酶抑制剂之间有什么差异？
两种酶抑制剂的用途相似。但酶抑制剂的来源不同。RNasin核酸酶抑制剂最初是从人的胎盘中分离的，目前还在用。重组的RNasin核酸酶抑制剂是由Promega研究的，用它为研究人员提供高质量和稳定的试剂。因为来源于大肠杆菌, 无人DNA的污染，故用途更广。
3. RNasin核酸酶抑制剂如何起作用？
RNasin核酸酶抑制剂是1个50kD大小的蛋白，它和RNA酶以非共价键按1：1结合，而抑制RNA酶活力，结合常数为10-14。
4. RNasin核酸酶抑制剂抑制哪些核酸酶和聚合酶？不抑制哪些酶？
RNasin核酸酶抑制剂抑制活力如表所示
------------------------------------------------------
抑制 不抑制
RNaseA RNaseT1
RNaseB 核酸酶S1
RNaseC RNase(曲霉素)
RNase(胎盘) RNase ONETM 核酸酶
血管生成素 Taq DNA聚合酶
AMV 或M-MLV反转录酶
SP6, T7, T3 RNA聚合酶
------------------------------------------------------
5. RNasin核酸酶抑制剂反应的条件如何？
RNasin核酸酶抑制剂的反应条件为pH5-8(最适pH7-8)。
6. 使用RNasin核酸酶抑制剂应避免哪些条件？
简单而言，应避免使RNasin核酸酶抑制剂和RNA酶复合物解聚。应避免使RNasin核酸酶抑制剂失活。具体的因素是温度>50oC, 尿素，SDS，或其他变性剂。
7. RNasin核酸酶抑制剂的活力单位如何？
定义为抑制5ngRNase A水解2`，3`-单磷酸环化胞苷的50%的活力所用的抑制剂的量。
8. 动物注射型RNasin核酸酶抑制剂和其它两种RNasin核酸酶抑制剂有何差异？
动物注射型RNasin核酸酶抑制剂适用于活体研究。抑制剂中内毒素的活力经处理低于1.0unit/mg蛋白。还提供生理溶液：
1.5mMKH2PO4/8.1mMNa2HPO4/2.7mMKCl/137mMNaCl,pH7.4(37oC)。
9. 动物注射型RNasin核酸酶抑制剂适用于哪些研究？
动物注射型RNasin核酸酶抑制剂适用于在活体中研究血管生成，因动物注射型RNasin核酸酶抑制剂具有抑制小鼠中血管生成的功能。它和血管中的血管生成素结合，使其丧失促血管再生能力。
|
|
|
|
